La spectroscopie de fluorescence est une technique très riche qui permet d'analyser l'effet de modifications de l'environnement (pH, ligands…) sur les propriétés de fluorescence de sondes intrinsèques, comme le tryptophane des protéines, ou de fluorophores greffés. Elle s'applique à l'étude de la stabilité conformationnelle des macromolécules, en particulier des protéines (fluorescence directe, quenching de fluorescence), et à la caractérisation des interactions moléculaires comme les interactions protéines-protéines, protéines-lipides ou protéines-acides nucléiques (utilisation du transfert d'énergie FRET ou RET à l'état stationnaire). La plateforme permet l’analyse en fluorescence stationnaire ou bien résolue en temps.
Equipement
Fluorimètre Horiba Jobin-Yvon Fluorolog 3
Mode point, spectre, cinétique, 3D
Faible quantité d’échantillon (micro-cuve min. 120 µL)
Contrôle de la température par Peltier
Fluorescence stationnaire : Monochromateur continu à l’excitation (200-700 nm) et à l’émission (300-1000 nm)
Temps de vie de fluorescence (Time-correlated single-photon counting TCSPC) : Excitation par LED pulsée à 295 ou 473 nm
